口腔上皮细胞用什么染色?
龙胆紫溶液染色 (最简单、最常用)
这是中学和大学基础实验中最经典、最常用的方法,操作简单,染色效果清晰,足以观察细胞的基本形态。
(图片来源网络,侵删)
原理: 龙胆紫是碱性染料,细胞核中的染色体(主要成分是DNA和蛋白质)呈酸性,因此很容易被龙胆紫染成深紫色,细胞质和细胞膜的染色很浅,几乎透明,从而形成鲜明对比。
优点:
- 操作简单: 步骤少,容易掌握。
- 效果明显: 细胞核染色深,对比度高,易于观察。
- 成本低廉: 试剂便宜易得。
缺点:
- 染色单一: 只能染细胞核,无法观察细胞质、液泡等其他细胞器。
实验步骤:
(图片来源网络,侵删)
- 取材: 清水漱口,用消毒牙签在自己口腔内侧壁(腮帮子内侧)轻轻地刮几下。
- 涂片: 将牙签上刮下的物质,均匀地涂抹在洁净的载玻片中央。
- 固定: 滴一滴生理盐水在涂片上,目的是保持细胞形态,防止其破裂,然后盖上盖玻片。
- 染色: 在盖玻片的一侧滴加一滴龙胆紫溶液,另一侧用吸水纸吸引,使染液缓缓渗过整个标本。
- 观察: 用吸水纸吸去多余染液,将制好的临时装片放在显微镜下观察,先用低倍镜找到细胞,再用高倍镜观察,你会看到许多不规则、彼此相连的块状,每个块状就是一个上皮细胞,细胞中央被染成深紫色的就是细胞核。
亚甲基蓝溶液染色 (比龙胆紫更温和)
亚甲基蓝也是一种常用的碱性染料,效果与龙胆紫类似,但通常被认为更温和一些。
原理: 同样是利用碱性染料与酸性物质(细胞核中的核酸)结合的原理。
优点:
- 染色效果与龙胆紫类似,但背景可能更清晰一些。
- 也是基础实验的常用选择。
缺点:
- 同样只能染细胞核。
实验步骤: 与龙胆紫染色法基本完全相同,只需将第4步中的“龙胆紫溶液”替换为“亚甲基蓝溶液”即可。
碘液染色 (也可用于观察淀粉)
碘液不仅可以用来观察淀粉(遇碘变蓝),也可以用来染细胞。
原理: 碘液本身是淡黄色,当它进入细胞后,细胞核中的核酸会与之结合,使细胞核呈现更深的黄色或浅棕色。
优点:
- 试剂安全,无毒。
- 如果实验目的是观察淀粉粒(如观察口腔中的食物残渣),可以一物两用。
缺点:
- 染色较浅,对比度不如龙胆紫明显,对细胞核的染色效果稍差。
实验步骤: 与龙胆紫染色法基本相同,只需将第4步中的“龙胆紫溶液”替换为“稀释的碘液”即可,注意,通常使用稀释的碘液,染色时间不宜过长。
詹纳斯绿B和伊红Y染色 (复染,更专业)
这种方法更复杂,但能同时染出细胞核和细胞质,提供更丰富的信息,通常在更高级的实验或教学中使用。
- 詹纳斯绿B (Janus Green B): 专一性染线粒体的活体染料,线粒体能保持其氧化状态,使染料保持蓝绿色。
- 伊红Y (Eosin Y): 酸性染料,主要染细胞质和细胞外基质,使其呈现粉红色或红色。
原理: 利用两种不同性质的染料,分别对细胞中不同性质的细胞结构进行特异性染色。
优点:
- 信息丰富: 能同时显示细胞核、细胞质和线粒体。
- 专业性强: 更接近组织学染色。
缺点:
- 操作复杂: 步骤繁琐,对试剂和操作要求高。
- 时间成本高: 染色过程较长。
实验步骤: 通常需要先进行活体染色(用詹纳斯绿B染线粒体),然后再用固定液和伊红Y进行复染,过程远比前几种方法复杂。
总结与对比
| 染色方法 | 主要染色对象 | 优点 | 缺点 | 适用场景 |
|---|---|---|---|---|
| 龙胆紫溶液 | 细胞核 | 操作简单,效果明显,成本低 | 只能染细胞核 | 中学生物实验、基础观察 |
| 亚甲基蓝溶液 | 细胞核 | 操作简单,效果较好,比龙胆紫温和 | 只能染细胞核 | 基础观察,可作为龙胆紫的替代品 |
| 碘液 | 细胞核(浅黄/棕) | 试剂安全,可同时观察淀粉粒 | 染色浅,对比度不高 | 简单观察,或需同时观察淀粉时 |
| 詹纳斯绿B+伊红Y | 细胞核、细胞质、线粒体 | 信息丰富,专业性强 | 操作复杂,成本高,耗时长 | 高级实验、组织学教学、专业研究 |
核心要点与建议
对于绝大多数初学者和学生实验来说,首选龙胆紫溶液染色法,它完美地满足了“观察口腔上皮细胞基本形态和细胞核”这一核心教学目标,且操作简单,成功率高。
温馨提示:
- 刮取力度要轻: 用力过猛会刮下太多组织,导致细胞重叠,影响观察。
- 盖盖玻片要规范: 盖盖玻片时,先让盖玻片的一边接触液滴,然后缓缓放下,可以避免产生气泡。
- 染色要适度: 染色时间不宜过长,否则整个视野都会被染成深色,反而看不清细胞结构。
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作者:99ANYc3cd6本文地址:https://www.schc.com.cn/post/2054.html发布于 12-02
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